由于·O2 - 為不穩(wěn)定自由基,測定SOD活性一般采用間接方法,比如鄰苯三酚自氧化法、氮 藍(lán)四唑(NBT)光還原法、黃嘌呤氧化酶法等 . 采用鄰苯三酚自氧化法測定了鐵皮石 斛中SOD酶的活性,并將提取的SOD酶放在酸奶中發(fā)酵.可見分光光度計(U2000PRO,上海佑科儀器儀表有限公司)、電熱恒溫培養(yǎng)箱(BXP-65, 廣州滬瑞明儀器有限公司)、冷凍高速離心機(jī)(TD5K-II,長沙東旺試驗儀器有限公司)等.粗酶液中加入等體積的冷丙酮,攪拌15 min,5 000 r/min轉(zhuǎn)速下離 心 15 min,得 SOD 沉淀 . 將 SOD 沉淀溶于 5 mL 0.05 mol/L 磷酸緩沖液( pH 7.8)中,得到 SOD 酶液,量取一定體積上清液. 所得的SOD酶液保存在4 ℃的冰箱里,防止酶失活.
哈密瓜的 SOD酶活性極低,則抗氧化能力也極低,貯藏時間相對 來說就會較短,水果變質(zhì)的可能性更大,那么需要通過其他方式,例如增加外源 SOD酶來延 長其貯藏時間,使得哈密瓜的品質(zhì)更好.抗氧化性是菠蘿>中華獼猴桃>草莓>哈密瓜 . 哈密瓜的自由基的抑制率 僅有4.00%,說明其抗氧化性極差. 4種水果的SOD酶活性與抗氧化性一致,說明在4種水果 中的關(guān)鍵抗氧化物質(zhì)為SOD酶.